亚洲v天堂-亚洲v天堂v手机在线观看-亚洲v在线-亚洲wu码-国产一区二区三区精品久久呦-国产一区二区三区精品视频

LCM技能別離細(xì)胞速度較以往辦法有很大進(jìn)步，例如，從腎安排切片中別離一個(gè)腎小球（Glomerulus）所需時(shí)刻小于10秒，一小時(shí)內(nèi)即可輕松地別離上百個(gè)腎小球。
神經(jīng)體系首要由兩類細(xì)胞構(gòu)成：神經(jīng)元和膠質(zhì)細(xì)胞。
在腦內(nèi)，不一樣解剖區(qū)域行使不一樣功用，這兒所講的解剖區(qū)域是指核團(tuán)。
美國(guó)國(guó)立健康研討院腫瘤研討所病理研討室與生物醫(yī)學(xué)設(shè)備組協(xié)作研發(fā)激光捕獲顯微切開技能，發(fā)展為Acturus 的PixCell II體系。
在操作這套體系時(shí)，首要在安排切片上掩蓋一層通明的膜，在顯微鏡下查詢?cè)摪才徘衅暨x某一分外細(xì)胞后，打開脈沖式紅外激光束，使膜融化變得粘性很強(qiáng)（該膜的成份為 Ethylene Vinyl Acetate Polymer），等到冷卻后將該方位的細(xì)胞牢固地粘附在上面然后別離細(xì)胞。
該種辦法較以往辦法改善的當(dāng)?shù)兀菏滓?jiǎn)略，不需求移動(dòng)任何切片部位，一步即可完畢從安排中別離分外細(xì)胞，這些在膜上的細(xì)胞依然堅(jiān)持其原有的形狀，運(yùn)用無菌、一次性的膜可zui大極限地防止或許的污染。
因此，假定研討者首要是為了研討很多種基因在特定核團(tuán)的神經(jīng)元或膠質(zhì)細(xì)胞的表達(dá)狀況，新的解決方案之一便是組合LCM技能、RNA擴(kuò)增技能和基因芯片技能。
即運(yùn)用LCM技能將特定核團(tuán)的神經(jīng)元或膠質(zhì)細(xì)胞取出，獲取總RNA或mRNA，RNA反轉(zhuǎn)錄為cDNA并進(jìn)行擴(kuò)增.zui終將cDNA標(biāo)記為探針，和基因芯片雜交。
假定研討的基因品種數(shù)不多，那么也能夠只獲取LCM取得的細(xì)胞的總RNA，運(yùn)用定量RT-PCR技能來進(jìn)行基因表達(dá)剖析。
這關(guān)于后續(xù)進(jìn)行PCR查看是尤為重要的。其次，使膜活化所需的激光能量很小（<50mW），與慣例顯微協(xié)作是滿足的，完夠滿足臨床病理安排細(xì)胞顯微別離的需求。
核團(tuán)在顯微鏡下才能夠區(qū)別，是相對(duì)會(huì)合在一個(gè)區(qū)域的或許行使必定功用的神經(jīng)元和膠質(zhì)細(xì)胞的集合體。
把某個(gè)核團(tuán)從腦內(nèi)取出來是不太實(shí)踐的。腦內(nèi)核團(tuán)數(shù)以百計(jì)，假定要想研討基因在腦內(nèi)核團(tuán)的表達(dá)水平，在早年只能用原位雜交技能。
假定要想研討蛋白質(zhì)的表達(dá)水平或磷酸化等狀況，只能用免疫安排化學(xué)技能。
而這兩個(gè)技能雖然能準(zhǔn)確定位基因或蛋白質(zhì)在腦內(nèi)核團(tuán)的表達(dá)狀況,缺點(diǎn)是通量小。